HRP-SH|巰基修飾的辣根過氧化物酶的描述

巰基修飾的辣根過氧化物酶（HRP-SH）是一種經過化學修飾的辣根過氧化物酶，其分子中引入了巰基（-SH）。以下是其詳細介紹：

結構特點

辣根過氧化物酶是一種含四個二硫鍵的單鏈多肽，由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結合而成的糖蛋白，含18%碳水化合物。巰基通過與HRP分子中的特定基團反應而結合，形成HRP-SH復合物。

制備方法

• 化學修飾法：通過特定的化學試劑與辣根過氧化物酶反應，引入巰基。例如，使用2-亞氨基硫烷鹽酸鹽與辣根過氧化物酶在適當的緩沖液中反應，生成巰基修飾的HRP。

• 試劑盒法：如Abbkine的LliKine™辣根過氧化物酶(HRP)偶聯試劑盒，提供了一種簡單快速的方案，將HRP直接偶聯到含有自由氨基的蛋白質、多肽或其他配體上。

功能特性

• 催化活性：HRP-SH保留了辣根過氧化物酶的催化能力，能夠催化多種底物的氧化反應，如在過氧化氫存在下，催化底物產生顏色變化或化學發光信號。

• 反應性基團：巰基作為反應性基團，能夠與其他含有活性基團的分子發生反應，形成穩定的共價結合。例如，巰基可以與馬來酰亞胺基團反應，用于標記抗體、蛋白質或其他生物分子，實現信號放大和檢測。

應用領域

• 免疫檢測：在酶聯免疫吸附測定（ELISA）、免疫印跡（Western blot）、免疫組化等實驗中，HRP-SH可作為標記酶，與抗體結合，用于檢測抗原或抗體的存在和含量。

• 生物傳感器：可用于構建生物傳感器，通過與目標生物分子結合，產生可檢測的信號變化，用于檢測生物分子、藥物和環境污染物等。

• 化學合成：巰基可以參與多種化學反應，如縮合反應和還原反應，為藥物合成和材料科學提供多種合成路徑。

注意事項

• 保存條件：HRP-SH應在冷藏條件下（-20℃）保存，以保持其活性和穩定性。

• 使用前處理：使用前需根據具體實驗要求進行適當的處理，如溶解、稀釋等，并注意避免反復凍融。

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