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Streptavidin PLA Particles,鏈霉親和素修飾PLA微球的描述

2025-10-12 [75]

鏈霉親和素修飾PLA微球是通過(guò)化學(xué)方法將鏈霉親和素蛋白共價(jià)結(jié)合到聚乳酸(PLA)微球表面形成的功能化顆粒,結(jié)合了PLA的生物相容性、可降解性以及鏈霉親和素對(duì)生物素的高特異性結(jié)合能力,在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價(jià)值。

一、特性

  1. 高特異性結(jié)合:鏈霉親和素對(duì)生物素具有較高的親和力(親和常數(shù)約10?1? M),可特異性捕獲生物素標(biāo)記的分子(如抗體、核酸、蛋白質(zhì)等),形成穩(wěn)定復(fù)合物。

  2. 良好的懸浮性與分散性:PLA微球粒徑可控、表面可電荷調(diào)節(jié),使微球在緩沖液中懸浮穩(wěn)定,不易聚集。

  3. 生物穩(wěn)定性強(qiáng):鏈霉親和素即便在化學(xué)交聯(lián)或包埋后仍保留生物活性,且與生物素結(jié)合不易解離,確保功能穩(wěn)定性。

  4. 功能擴(kuò)展性強(qiáng):微球表面殘余活性基團(tuán)(如羧基、羥基)可進(jìn)一步修飾熒光染料、抗體、酶等,拓展應(yīng)用范圍。

  5. 高比表面積:提供大量結(jié)合位點(diǎn),可高效負(fù)載生物素標(biāo)記的分子,提高反應(yīng)效率。

二、制備方法

  1. PLA微球制備

    • 乳液聚合法:將PLA溶于有機(jī)溶劑中,加入乳化劑形成油包水型乳液,通過(guò)揮發(fā)去除溶劑后固化得到PLA微球。

    • St?ber法:適用于制備二氧化硅-PLA復(fù)合微球,通過(guò)水解縮合反應(yīng)在微球表面引入活性基團(tuán)。

  2. 表面活化處理

    • 利用化學(xué)方法(如使用氧化劑、酸或堿等)對(duì)PLA微球表面進(jìn)行處理,使其表面產(chǎn)生活性基團(tuán)(如羥基、羧基等),以便后續(xù)與鏈霉親和素進(jìn)行共價(jià)結(jié)合。

    • 常用的活化劑有戊二醛、碳二亞胺等。

  3. 共價(jià)結(jié)合鏈霉親和素

    • 將鏈霉親和素與活化后的PLA微球在適當(dāng)?shù)臈l件下(如一定的溫度、pH值和反應(yīng)時(shí)間)進(jìn)行反應(yīng),使鏈霉親和素通過(guò)共價(jià)鍵連接到微球表面。

    • 反應(yīng)過(guò)程中需控制條件以確保結(jié)合效率和活性保留。

  4. 脫除未反應(yīng)的鏈霉親和素

    • 反應(yīng)結(jié)束后,通過(guò)洗滌、離心等方法去除未與PLA微球結(jié)合的鏈霉親和素,確保產(chǎn)品純度。

三、儲(chǔ)存注意事項(xiàng)

  1. 儲(chǔ)存條件

    • 一般需密封,在-20℃的環(huán)境中冷藏保存,切勿凍存,以保持其穩(wěn)定性和活性。

    • 避免高溫環(huán)境,以防PLA微球融熔變形或粘結(jié)成團(tuán)。

  2. 使用前處理

    • 在使用前需要用純水或所用緩沖溶液清洗2-3遍,以去除可能殘留的雜質(zhì)和未結(jié)合的物質(zhì)。

  3. 使用過(guò)程中注意事項(xiàng)

    • 應(yīng)盡量避免長(zhǎng)時(shí)間超聲破壞微球表面,因?yàn)槌暱赡軙?huì)導(dǎo)致微球結(jié)構(gòu)的損壞或鏈霉親和素從微球表面脫落。

    • 注意避免混入多價(jià)陽(yáng)離子和有機(jī)溶劑等可能影響微球性能的物質(zhì)。

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